Was ist ein Endotoxintest und wann ist eine Pyrogenkontrolle erforderlich?

Beyond Biopharma | Häufig gestellte Fragen zu pharmazeutischer Gelatine

Kurze Antwort:Die Endotoxinprüfung misst bakterielles Endotoxin, ein Pyrogen, das Fieber auslösen kann, wenn es in den Blutkreislauf gelangt. Typischerweise wird hierfür der Limulus-Amöbozytenlysat-Test (LAL-Test) oder ein vergleichbares, gängiges Verfahren eingesetzt. Die Pyrogenkontrolle ist nur in bestimmten Kontexten erforderlich, hauptsächlich dann, wenn Gelatine oder ein daraus hergestelltes Material für Injektionspräparate, Impfstoffe, Biologika oder andere sterile Anwendungen bestimmt ist. Gelatine für herkömmliche orale Kapseln und Tabletten wird normalerweise nicht auf Endotoxine geprüft. Die jeweils geltenden Anforderungen richten sich nach dem Endprodukt und den aktuellen regulatorischen Rahmenbedingungen.

Pyrogene und Endotoxine: der grundlegende Unterschied

Pyrogene sind Substanzen, die Fieber auslösen können, wenn sie in den Blutkreislauf gelangen. Bakterielles Endotoxin, ein Bestandteil der äußeren Membran gramnegativer Bakterien, ist das häufigste und am besten untersuchte Pyrogen und steht daher im Fokus pharmazeutischer Tests. Endotoxine sind hitzestabil und überstehen somit Prozesse, die die Bakterien selbst abtöten. Aus diesem Grund müssen Materialien, die steril oder parenteral angewendet werden sollen, getestet werden und dürfen nicht als rein angenommen werden.

Warum die Anforderung vom Verwaltungsweg abhängt

Der menschliche Körper toleriert Endotoxine je nach Verabreichungsweg sehr unterschiedlich. Der Verdauungstrakt ist routinemäßig Endotoxinen ausgesetzt und verarbeitet diese normalerweise. Daher benötigen orale Darreichungsformen wie Kapseln und Tabletten in der Regel keine Pyrogen- oder Endotoxinkontrolle. Endotoxin wird erst dann zu einem kritischen Qualitätsmerkmal, wenn ein Stoff oder sein Extrakt in den Blutkreislauf, in Gewebe oder andere normalerweise sterile Bereiche gelangen kann, wie beispielsweise bei Injektionspräparaten, parenteralen Formulierungen, der Stabilisierung von Impfstoffen oder Biologika sowie bestimmten Wundversorgungs- oder Gewebekontaktanwendungen.

Wenn die Pyrogen- oder Endotoxinkontrolle für Gelatine gilt

• Injektions- oder parenterale Darreichungsformen- Wird Gelatine in einer Injektionsformulierung verwendet, muss der Hilfsstoff normalerweise die für dieses Produkt festgelegten Endotoxinanforderungen erfüllen.
• Impfstoffe und Biologika- Die als Stabilisator in Injektionspräparaten verwendete Gelatine wird anhand der Spezifikationen des Endprodukts kontrolliert.
• Sterile und medizinische Anwendungen- Bei bestimmten Anwendungen mit Gewebekontakt, Implantaten oder Geräten kann die Verwendung von endotoxinarmem Material erforderlich sein.
• Spezielle, nicht gelierende Sorten- Hydrolysierte oder nicht gelierende Gelatine für die Zellkultur oder ähnliche Zwecke werden manchmal auch in endotoxinarmer Qualität angeboten, allerdings nur dann, wenn die Anwendung dies erfordert.

Konventionelle pharmazeutische Gelatine für Kapselhüllen, Tabletten und andere orale feste Darreichungsformen unterliegt normalerweise keinen Endotoxingrenzwerten, da das fertige Produkt keine solche Anforderung erfüllt.

Gängige Testmethoden

Wenn ein Endotoxintest erforderlich ist, richtet sich die Wahl der Methode nach dem aktuellen Arzneibuch und der Produktmonographie. Der bekannteste Test ist der Limulus-Amöbozytenlysat-Test (LAL-Test), bei dem ein Lysat aus Blutzellen des Pfeilschwanzkrebses verwendet wird und der auf Endotoxin mit einer messbaren Gerinnungs- oder Farbreaktion reagiert. Rekombinante Faktor-C-Tests und der Monozytenaktivierungstest (MAT) sind neuere Optionen, und der Kaninchenpyrogentest misst die Fieberreaktion direkt und nicht nur das Endotoxin. Die Ergebnisse werden üblicherweise in Endotoxineinheiten angegeben, beispielsweise pro Gramm oder pro Milligramm Material, gemäß der vereinbarten Spezifikation.

Worauf Sie bei einem Echtheitszertifikat achten sollten

Wenn Ihr Produkt tatsächlich eine Gelatine mit niedrigem Endotoxingehalt benötigt, bitten Sie den Lieferanten um eine Sorte mit dokumentiertem niedrigem Endotoxingehalt und prüfen Sie, ob das Analysezertifikat das Endotoxin-Ergebnis mit der verwendeten Methode und dem Grenzwert angibt. Bei oralen Kapseln oder Tabletten ist es nicht erforderlich, dass ein Zertifikat für Lebensmittel- oder Kapselqualität einen Endotoxin-Anteil enthält; umgekehrt ist eine Kapselqualität nicht automatisch für die Injektion geeignet. Klären Sie im Zweifelsfall die Anforderungen mit Ihrem Zulassungs- oder Qualitätssicherungsteam, bevor Sie die Sorte festlegen.

Weiterführende Lektüre

Für einen umfassenderen Überblick sieheWie man eine Spezifikation für pharmazeutische Gelatine (CoA) liestUndWelche mikrobiologischen Grenzwerte gelten für pharmazeutische Gelatine?Die